使用凍干機制備凍干復合膠原基質(zhì)的大概過程:
1、在無菌條件下將膠原浸泡于冰冷-4'C、0.1%的醋酸溶液中,膠原濃度為8-10mg/Ml范圍,調(diào)節(jié)PH值到7.2—7.3制備膠原溶液,操作應在4"進行;
2、在膠原溶液中加入L)步驟所得的細胞外基質(zhì)混合物,得到復合膠原溶液,復合膠原溶液中細胞外基質(zhì)混合物與膠原的質(zhì)量比例為2-2.5:7.5-8;
3、取Lml制備好的復合膠原溶液置于孔徑為3.5Cm的圓形模具中或6孔細胞培養(yǎng)板中,用0.Lml的1%—1.5%的戊二醛溶液4'C共價交聯(lián)24士0.5小時,用0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS)漂洗2-3次,制成海綿狀復合膠原基質(zhì);
將復合膠原基質(zhì)用波長254nm、36W的紫外線照射除菌后放置在低溫冰箱冷凍過夜12-18小時,然后再在真空低溫條件下,凍干機真空冷凍干燥24土1小時,即可得到制備復合膠原支架。
Pilot5-8ES真空冷凍干燥機是為食品、中藥材、保健品等物質(zhì)冷凍干燥處理設計的機型。
型號 | Pilot3-6ES | Pilot5-8ES | Pilot7-12ES | Pilot10-15ES |
規(guī)格 | 箱阱分離 (GMP) | 箱阱分離 (GMP) | 箱阱分離 (GMP) | 箱阱分離 (GMP) |
凍干面積 | 0.35㎡ | 0.525㎡ | 0.8㎡ | 1.0㎡ |
φ22西林瓶裝量(20ml) | ≥900支 | ≥1170支 | ≥1500支 | ≥2100支 |
板層尺寸(mm) | 350*500 | 350*500 | 350*570 | 350*570 |
冷阱溫度 (空載) | -85℃ | |||
真空度 (空載) | <3Pa | |||
板層溫度(空載) | -55℃ | |||
板層制冷方式 | 硅油循環(huán) | |||
捕水能力 | 6L | 8L | 12L | 15L |
凍干效率 | 3L/24H | 5L/24H | 7L/24H | 10L/24H |
板層間距 | 50mm | 50mm | 50mm | 50mm |
壓塞 | 電動 | |||
壓縮機功率 | 2*1.5HP | 2*2HP | 2*3HP | 2*3HP |
真空泵 | 6L/S | |||
整機尺寸 (約) | 寬760×深1340×高1700 | 寬760×深1340×高1700 | 寬760×深1440×高1800 | 寬760×深1440×高1800 |